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慢病毒简介:慢病毒(Lentivirus) 载体是以HIV-1 (人类免疫缺陷Ⅰ型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。 慢病毒载体可以将外源基因或外源的shRNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的的基因治疗效果。对于一些较难转染的细胞, 如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,使用慢病毒载体,能大大提高目的基因或目的shRNA的转导效率,且目的基因或目的shRNA整合到宿主细胞基因组的儿率大大增加,能够比较方便快捷地实现目的基因或目的shRNA的长期、稳定表达。 所以,在体外实验及体内实验的研究中,慢病毒己经成为表达外源基因或外源shRNA的常用载体形式之一, 并且正在获得越来越广泛的应用。 慢病毒包装系统组成:慢病毒包装系统一般由慢病毒表达载体和慢病毒包装载体组成。 慢病毒表达载体,即通常所说的穿梭载体,包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。而慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装, 包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染。 现在的慢病毒包装系统一般都是三质粒或四质粒包装系统。其中四质粒系统比三质粒系统在生物安全性上更好一些,所以应用较多。 赢润生物慢病毒包装系统:目前市面上常见的商业化慢病毒包装系统较多,其中常用的有Clontech 、Invitrogen 等公司的相关产品。赢润生物通过大量实验摸索,博采众家之长,建立起了一套稳定、可靠、高效的慢病毒包装系统。这套慢病毒包装系统, 其慢病毒表达载体主要来自Clontech公司,包括以下载体:
您可以根据需要,选用合适的穿梭载体,用来装载目的基因或者目的shRNA 。在实际使用过程中,我们发现Clontech配套的慢病毒包装质粒不是很好用,出毒效率不高,所以, 我们采用了Invitrogen公司的惺病毒包装质粒来进行配套,其包括pLPl 、pLP2 、pLP/VSVG三个质粒。将这三个质粒与Clontech的慢病毒表达载体进行混合,导入293T包装细胞,能够高效地出毒。 慢病毒包装流程:(一)表达基因用慢病毒包装流程:
(二)表达shRNA 用慢病毒包装流程:
慢病毒包装价格及周期:
慢病毒对照价格及周期:
客户须知:
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