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一. 产品概述随着microRNA研究的日渐火爆,越来越多的学者投身于microRNA的研究热潮中。在绝大多数miRNA相关的研究课题中,都包含有组织或者细胞样本中miRNA表达量检测的内容。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northern Blot等基于分子杂交的方法,但是这些方法敏感度低、耗时长、RNA的用量较大,对大多数研究者来说都不适用。 赢润生物开发的YRBIO miRNA qPCR Detection Primer Set采用了国际上公认的核酸检测标准技术——Real-Time PCR技术来对miRNA进行检测,具有快速、特异性强、灵敏度高等优点。 二. 产品信息针对miRbase上已经登录的每个microRNA,赢润生物均可提供相对应的引物套装或Kit。您在订购时,可以先查询数据库,然后告诉我们您的目的miRNA名称即可。
三. 实验原理YRBIO miRNA qPCR Detection Primer Set采用的是大量文献使用、已获得广泛认可的Stem-loop法,其包含miRNA特异的逆转录引物,以及qPCR正、反向引物。其中茎凸环结构状的miRNA特异逆转录引物可特异性的转录成熟的miRNA。再利用高度特异的正反向引物,使miRNA定量即灵敏又高度特异。 YRBIO miRNA qPCR Detection Primer Set提供了一种最低能检测到5个拷贝目标miRNA的高灵敏度的检测方法,并且具有一个7个数量级的动态变化范围,反应的模板可以是总RNA或已纯化的小RNA等。
图1:miRNA qPCR检测原理(Stem-loop法) 四. 相关实验数据1. 良好的熔解曲线![]() (图2:用针对mir-193、mir-361的qPCR引物检测大鼠海马神经元细胞中rno-mir-193、rno-mir-361的表达情况,以U6作为内参。可以看到,mir-193、mir-361和U6引物的熔解曲线都非常好。) 2. miRNA qPCR检测实例
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