|
|
信息名称：人MTHFR基因多态性检测试剂盒（荧光PCR法） 货号：#MS601 规格：25人份/盒 价格：1200元/盒 产品应用MTHFR基因编码合成5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶，能催化5,10-亚甲基四氢叶酸产生5-甲基四氢叶酸，参与甲基传递与核苷酸合成，是叶酸代谢过程中的关键酶。MTHFR基因位点突变对酶的活性和热稳定性影响很大，会造成叶酸水平降低及血液中同型半胱氨酸浓度升高，进而引起心脑血管疾病的发生、新生儿或胎儿神经管缺陷的风险也大大增加。c.677(C/T)是MTHFR最常见SNP位点，突变可造成位点编码的氨基酸由丙氨酸变成缬氨酸，纯合突变型（677TT）酶活性下降65％以上。本试剂盒通过病人外周血基因组DNA可定性检测出MTHFR基因型，为临床医生个体化用药提供指导。 检测原理本试剂盒采用等位基因特异PCR与TaqMan荧光探针技术相结合的方法，检测MTHFR基因多态性。根据c.677(C/T)位点设计野生型和突变型引物，当模板与引物3末端完全匹配时，PCR反应才能高效的进行，产生荧光信号累积；反之则读取不到荧光信号或者CT值很高（低效扩增得到），野生型和突变型位点分管检测，通过扩增曲线和CT值判断MTHFR基因c.677(C/T)位点基因型。 主要组成
储存条件及有效期-20℃避光保存，有效期10个月 样本要求1. 样本类型：由外周静脉全血样本提取得到的人基因组DNA； 2. DNA质量：浓度10~200ng/μl，纯度OD260/280值在1.7~2.0之间，DNA样品-20℃保存时间不应超过6个月。 使用方法1. 反应体系
2. 反应程序
结果判读
质量控制1. 每次上机都需要做空白对照和质控检测； 2. 质控品CT(HEX)值和阳性对照CT(FAM)值均应小于28； 3. 空白对照应无扩增信号，FAM和VIC通道均检测不到荧光；当有扩增信号时，其CT(HEX)值和CT(FAM)值大于30为非特异性扩增属正常现象； 4. 若内控扩增曲线不呈S型或质控品ΔCT(FAM-HEX)＞3或阳性对照未检测到FAM荧光，则反应无效。 检测方法的局限性本试剂盒不能直接用于检测全血样本，样本基因组DNA加入量不应低于20 ng；检测结果不作为临床诊治的唯一依据，对患者的临床管理应结合其症状、病史、治疗反应和流行病学等信息综合考虑。 实验图例
图1 MTHFR c.677位点 CC野生型
图2 MTHFR c.677位点 CT杂合突变型
图3 MTHFR c.677位点 TT纯合突变型 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
