GeneDelta转基因小鼠定制服务

【平台概述】

本公司整合手工克隆技术及基因编辑技术首创 GeneDeltaTM 模式动物基因编辑平台,该平台是在细胞基因编辑平台基础上建立的产业化模式动物基因编辑平台,主要服务内容包括基因敲除模型、基因条件性敲除模型、基因定点敲入模型、基因定点突变模式等,以廉价高效的标准化流程来满足广大客户的各类模式动物基因编辑需求。

    平台理念:GeneDeltaTM 平台是由一群激情勃发的年轻研究团队组建的,团队有着多年的克隆技术和传统基因打靶技术的经验积累,目前专注于转基因小鼠模型的构建。平台拥有300平SPF级鼠房以及完善的硬件设备,为小鼠转基因高效开展提供充分的保障。平台始终以加速客户科研进度为己任,誓言要打破业内转基因小鼠模型构建费用高、周期长的垄断壁垒。

 

【技术原理】

    平台细胞系基因编辑技术成熟,多年克隆经验积累也显著提高了克隆小鼠出生率[1]。平台有包括 CRISPR/Cas9 系统和 TALEN 系统在内的基因编辑工具,可以轻松的在基因组任何位置进行编辑操作。

    第一步,针对ES细胞系进行基因编辑操作,筛选出阳性细胞系作为细胞核供体。该步骤优势在于,细胞水平进行基因编辑效率高,筛选方便。

    第二步,通过化学去核手工克隆技术将核供体细胞与去核卵细胞融合成为重构胚,进而抑制到代孕母鼠体内。平台改善了小鼠克隆技术,通过对Xist基因的抑制显著提高了重构胚的出生率,大大降低了小鼠克隆成本。本平台另一个优势为,由于在ES细胞水平已经经过筛选,因此出生的子代为100%预期基因型。

 

【特色优势】

价格最低,支付灵活:价格低于业界服务费用的30%-50%,通过对技术流程本身的成本控制最大化让利于客户,预付50%,不成功退款;

周期短:借助成熟的ES细胞编辑及手工克隆技术,一步法直接产生纯和基因型子代;

成功率高:细胞水平筛选阳性基因型后再进行核移植克隆,子代基因型阳性率100%

 

References】        

[1]. Inoue, K., et al., Impeding Xist Expression from the Active X Chromosome Improves Mouse Somatic Cell Nuclear Transfer. Science, 2010. 330(6003): p. 496-499.

[2]. Wang, H., et al., One-Step Generation of Mice Carrying Mutations in Multiple Genes by CRISPR/Cas-Mediated Genome Engineering. Cell, 2013. 153(4): p. 910-918.

 

Tips:为何选择我们?

GeneDeltaTM 平台与业界各类转基因小鼠构建平台的技术原理对比,本平台凸显了成本低、成功率高、周期短三个优势:

 

【服务内容】

(1)完全性基因敲除(Conventional Knockout)

完全性基因敲除是通过基因敲除技术,把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或者功能区域敲除掉,获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。

应用:用于研究某个基因(要求该基因非胚胎致死性基因)对全身生理病理的功能。

(2)定点突变/基因敲入(Knockin)

基因敲入可以在目的基因位置引进特定的突变或外源基因,该步骤。比如在目的基因上引入点突变(模拟人类遗传疾病模型) ;或将报告基因(如各种荧光标记,标签或LacZ等)通过同源重组的方式引入目的基因的特定位点,从而可以通过报告基因的表达跟踪目标基因的表达。通过报告基因的表达可以研究基因的表达谱。也可以用报告基因取代小鼠本身的基因,使KO/KI同时发生。

应用:用于药物筛选相关研究;用于信号通路的研究;用于示踪的相关研究,转化医学的研究。

(3)条件性基因敲除(Conditional Knockout)

条件性基因敲除是将目的基因两侧区域插入一对loxp位点制备出floxed小鼠。只当Cre酶存在时可以将loxp区间的序列删除,因此该floxed小鼠在与组织特异表达Cre酶小鼠杂交可以在特定的组织或细胞中敲除该基因,而该基因在其它组织或细胞表达正常。

应用:用于具有胚胎致死性目的基因的研究;用于研究基因在特定的组织或细胞中的生理病理功能;与控制Cre表达的其它诱导系统相结合,还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。