腺相关病毒包装
腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是简单的非病原单链DNA,需要辅助病毒(通常为腺病毒)参与复制。它编码两个末端的反向重复序列(ITR)中的cap和rep基因。ITRs对于病毒的复制和包装具有决定性作用。cap基因编码病毒衣壳蛋白, rep基因参与病毒的复制和整合。AAV能感染多种细胞。rep基因产物存在时,病毒DNA很容易整合到人类第19号染色体。
重组腺相关病毒载体(rAAV)源于非致病的野生型腺相关病毒,由于其安全性好、宿主细胞范围广(分裂和非分裂细胞)、免疫源性低,在体内表达外源基因时间长等特点,被视为最有前途的基因转移载体之一,在世界范围内的基因治疗和疫苗研究中得到广泛应用。经过10余年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型,制备基因敲除鼠等方面。
赢润生物采取的三质粒共转染系统进行重组腺相关病毒包装服务,包括从实验设计到载体构建、腺相关病毒包装、生产、纯化、质量鉴定等全套服务,为基础研究、临床研究的广大科研客户提供高纯度、高质量、高滴度的重组腺相关病毒。
腺相关病毒包装服务内容
我们将采取分步收费的方式,即按照所提供的构建,包装及纯化的一系列不同的服务,根据客户的实际需要,对每项服务进行具体的核算。腺相关病毒包装服务——穿梭载体:pAAV-MCS vector,pAAV-hrGFP vector,pAAV-IRES-hrGFP vector。包装细胞:AAV293。
采用三质粒共转染法包装2型和5型野生型而非复制缺陷型腺相关病毒。与腺病毒和慢病毒相比的优越性在于其安全性高,质粒小容易转染,产生的包装病毒数多,易于满足客户进行动物实验进行基因功能研究的需求。
腺相关病毒包装服务价格:
| 服务编号 | 服务项目 | 服务内容 | 服务价格 |
|---|---|---|---|
| AV1001 | 重组腺相关病毒载体构建 | 订购目的基因,更多选择尽在www.yrgene.com(可选) | 1700 |
| 构建重组腺相关病毒载体(可选) | 1500 | ||
| 质粒大提及质量检定(可选) | 500 | ||
| AV1002 | AVV生产细胞株的建立 | AAV生产细胞株转染条件的确定 | 3000 |
| AAV生产细胞株中目的基因进行PCR检测并发报告(可选) | 500 | ||
| 对AAV生产细胞株中目的基因的表达进行Western杂交检测并发报告(客户提供一抗) (可选) | 1000 | ||
| 对AAV生产细胞株中目的基因的表达进行ELISA检测并发报告(客户提供ELISA试剂盒)(可选) | 1000 | ||
| AV1003 | 重组AVV的制备与纯化(实验室研究用、非GMP级别) | 滴度为0.2-2×1012 vg | 10000 |
| 滴度为5×1012 vg | 15000 | ||
| 滴度为1×1013 vg | 25000 | ||
| 滴度为5×1013 vg | 60000 | ||
| AV1004 | 重组AVV质量检测 | 蛋白浓度测定法初步测定病毒颗粒滴度(vp/ml)(可选) | 500 |
| SDS-PAGE电泳检测病毒外壳及纯度(可选) | 500 | ||
| 病毒制品中目的基因PCR检测(客户提供该引物的序列)(可选) | 500 | ||
| 病毒制品的电镜分析及照片(可选) | 500 | ||
| Western或ELISA检测病毒感染细胞后基因的表达 (客户提供一抗试剂盒) (可选) | 1000 |
腺相关病毒包装服务承诺:
- 默认情况下,本公司包装的病毒只提供PCR检测和转染后的荧光照片结果,如果需要其他结果,客户根据自己的需要可以自行选择;
- 插入穿梭载体目的基因的测序报告,对于需要包装病毒的客户,将提供初步纯化的病毒液1010颗粒数/ml的病毒10ml以上,如客户需要纯化病毒,我们将根据与客户达成的协议提供1011-12颗粒数/ml以上的纯化后的病毒液,并附上一份QC报告;
- 公司为实验室研究者提供可用于细胞和动物实验的研究级AAV病毒载体的构建和制备服务,客户在60-90个工作日内获得1011~13 vg 的AAV病毒载体;
- 提供详尽、完整的实验报告。
客户须知
- 通常小鼠肌肉注射的用量为1×1010~3×1011vg之间,中等剂量是1×1011vg左右;
- 本公司采用三质粒共转染法包装腺相关病毒,报告基因为GFP;
- 本公司目前不提供致癌基因及毒基因等对人体有危害的基因的包装服务。
- 如客户所需包装的目的基因由客户提供,则客户应提供所要构建腺病毒的目的基因的序列及其它相关说明信息。客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
- 包装好的产品批量储存的最佳条件为-80°C。
