cDNA文库构建

cDNA文库不同于基因组文库,被克隆DNA是从mRNA反转录来源的DNA。cDNA组成特点是其中 不含有内含子和其他调控序列,从而做cDNA克隆时应是先从获得mRNA开始,在此基础上,通过反转录酶作用产生一条与mRNA相互补的DNA链,然后除 掉mRNA,以第一条DNA链为模板复制出第二条DNA链(双链);再进一步把此双链插入原核或真核载体。

cDNA文库构建流程

cDNA文库服务团队拥有一批优秀的文库构建专业技术人员,可以提供标准化cDNA文库构建以及EST测序和分析服务,可以针对动物、植物、微生物等组织和细胞等材料进行文库构建。

cDNA文库构建服务内容:

普通cDNA文库(质粒文库、噬菌体文库)构建

    普通cDNA文库特点:
  1. 用量少,只需要1ug的Total RNA;
  2. 采用Clontech SMART专利技术,技术成熟,全长比率。

均一化cDNA文库构建

均一化cDNA文库是克服基因转录水平上巨大差异给文库筛选和分析带来障碍的有效措施,有利于研究基因的表达和序列分析。我们基于双链特异性核酸酶(Duplex-Specific Nuclease, DSN)的先进cDNA文库均一化技术构建均一化cDNA文库,能减低高丰度表达基因100倍以上,有效富集低丰度表达基因。

    均一化cDNA文库特点:
  1. 反复杂交过程,均一化程度高。
  2. 均一化后平均插入片断大小无明显变化。

全长cDNA文库构建

利用公司专有技术和专门试剂盒,进行全长文库构建服务。尤其适合希望获得高比例全长基因的客户。

    全长文库特点:
  1. 不经过PCR过程,容易获得低丰度基因
  2. 全长比例高(全长比例80%)
  3. 样品用量大,需要25ug的mRNA,因此,不适合样品量少的材料。

cDNA文库构建服务价格:

  1. cDNA文库构建:1-3万元人民币
  2. 全长cDNA文库构建:3.0-5.0万元人民币
  3. 均一化cDNA文库构建:3.5-6万元人民币

cDNA文库构建服务周期:

实验周期一般为得到合格的总RNA后15~45个工作日。

客户须知:

  1. 客户须在实验开始前确保其提供材料的数量和质量,并提供相关信息。客户可提供组织(200~1000μg)、细胞(106)或总RNA (1μg ),请务必保持样品新鲜,RNA无任何降解,植物材料应避免过老的组织,尽量用柔嫩部位,以确保文库质量。同时请尽量提供物种基因组背景资料信息,如:基因组大小,基因平均长度,预计表达的基因数量等。
  2. 赢润生物在收到客户提供的研究材料后会在第二个工作日起开始服务工作。
  3. 构建好的cDNA文库将以连接产物的形式提供给客户,克隆载体一般为pDNR-LIB。
  4. 工作完成后,赢润生物会将结果及时发给客户,同时根据客户要求处理相关材料。

cDNA文库构建服务承诺:

  1. 在保证质量的前提下,在最短的时间内完成实验。
  2. 赢润生物保证检测结果准确、客观、可信。
  3. 公司将对所有技术服务相关材料信息保密,并会在服务完成后按客户要求对相关材料进行合理处理。