细胞荧光成像

荧光显微镜成像:

细胞生物学应用:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡等。

生物学、免疫学、环境科学和营养学应用:免疫荧光标记(单标、双标或三标)的定位,细胞膜受体或抗原的分布微丝、微管的分布、两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位等。

病理学应用:组织切片中镜检细胞(细胞器)变异,癌细胞标记物标记,其它标记性抗原(受体)检测,病原体检测等。

实验步骤:

构建质粒(可选)→共转细胞(可选)→免疫荧光(可选)→镜检及荧光成像(可选激光扫描共聚焦显微镜扫描)→图像处理及分析

服务说明

  由客户提供已构建好的目的基因表达质粒、抗体以及细胞器的特异性染料,如果不能提供构建好的表达质粒,则提供基因序列,由赢润生物提供克隆技术服务,须加收克隆及转染级质粒大提服务费用。赢润生物可标记细胞亚结构为:F-actin(pholloidin-FITC等染料法)、alpha-actin(免疫荧光标记)、微管(免疫荧光标记或活细胞稳定表达HeLa细胞株)、细胞膜、核孔复合体(Nup系列抗体)、线粒体(外膜、脊;标记方法可以MitoTracker染料或免疫荧光标记)、Golgi体(常用染料法)、自吞噬体(常用LC3-GFP稳定表达HeLa细胞株)、脂泡、细胞核(DAPI、PI、Hoechsst 33342等染料或者使用H2B-GFP稳定表达HeLa细胞株)、核仁、核膜、维管组织中心、过氧化物酶体、细胞伪足、色素斑等。

案例展示:

LC3-II mytophage

图中显示为转染某蛋白48小时后的荧光图像。红色为共转染的mitoDsRed(指示线粒体),绿色为稳定表达的LC3-GFP(指示自吞噬),蓝色指示免疫标记的目的蛋白。

活细胞成像与分析

平面固定化细胞成像技术引领科技革命的时代已经一去不复返。要在当今这种发展迅猛的市场环境下脱颖而出,就需要使用3D 和 4D旋转活细胞图像。您需要实时观看细胞活动,并且每次只查看一个细胞。活细胞成像不仅对细胞和组织的功能研究具有重要意义,而且对疾病的发病机理,临床诊断和治疗亦具有重要作用。是当前生物医学研究中的一个重要技术平台和研究热点。

活细胞成像技术要求

改善细胞环境

当成像时间增加时,细胞需要更好的环境调控。赢润生物为显微镜下的细胞提供与传统培养箱一致的培养环境。使镜检细胞环境与常规培养箱中的湿度、CO2、温度条件相同。

改良细胞探针

使用改良的高灵敏染料,在保证细胞受损最小的情况下进行图像收集。采用共区域化研究,并且对细胞的不同部分进行染色,就可以获得一个五彩缤纷的成像效果。激发波长之间的快速转换可以让不同的探针在相同的瞬间进行成像。高速CCD对活细胞进行实时扫描。

完善图像处理

活细胞成像将收集到海量的图像,动辄几十G的文件。赢润有多位受过高度训练的分子细胞生物学博士及硕士,掌握完整的图像处理及编程技术,对图像进行快速批量处理。常用imageJ等软件对收集图像进行分析,最终为客户提供可发表的图像。

ImageJ 图像处理

服务价格和周期

服务项目 服务内容 价格 周期
细胞、质粒或抗体准备(可选) 准备用于成像的细胞、质粒或抗体 询价 1周
荧光及成像 荧光成像,每个样本提供3-5张荧光照片 300元/样 2-3周
活细胞动态成像 活细胞动态成像 500/小时 1周
数据分析 配套服务 询价 1周