多基因的共表达

随着基因工程的快速发展，在宿主细胞中表达单个基因往往不能满足科研的需要，某些研究中需要实现多基因的共表达，特别是在代谢工程及表达复合蛋白等相关领域，涉及的共表达基因的数量有时多达20个。而多基因的共表达面临一些较复杂的问题，首先是没有合适的共表达载体，其次是基因的表达不均一，通常情况下个别基因的表达量明显高于其它的基因。赢润生物在多基因共表达方面有独到的见解，可以根据客户的要求，设计合理的策略，实现较多基因的共表达。

多基因的共表达适合服务的案例

1. 需要在同一宿主中共表达多个基因；
2. 蛋白复合物的表达与纯化；
3. 代谢通路的异源重建。

多基因的共表达策略

两个基因共表达可选双启动子表达载体或双质粒系统。

两个以上基因的共表达可选择同尾酶组合策略。

多基因的共表达服务流程

1. 根据客户提供的信息选择或设计实用的多基因共表达载体；
2. 设计巧妙的组合策略构建多基因重组质粒；
3. 选择合适的表达宿主，进行诱导表达体系的优化并实现多基因的协同共表达。

优化表达条件

可从以下方面使目标蛋白的表达达到最优化。

1. 增加蛋白溶解性及折叠

   温度、裂解缓冲液、细胞周质定位、细胞质定位、宿主菌

2. 稀有密码子
3. 毒性基因及质粒稳定性
4. 影响表达的其它因素

   N-端原则、二级翻译起始位点、意外终止密码子、

   转录终止子、不稳定目的 mRNA及蛋白

多基因的共表达客户提供

1. 提供含目的基因的重组质粒（或含重组质粒的菌株），运输过程中采取相应的措施避免质粒的降解或菌株的污染；赢润生物也可为客户提供基因调取服务，需另计费；
2. 提供基因的序列及重组质粒的测序报告；
3. 客户需提出预期的表达效果；
4. 如有其它特殊要求请提前说明。

多基因的共表达服务内容及价格

根据基因的数量和基因序列的复杂程度方可确定实验周期，服务价格仅供参考，具体价格依据单个基因的大小和复杂程度做适当调整，实验中相关的亚克隆需酌情收费。如需进行Western Blot 检测则另计费，如需采用较特殊的表达宿主则另计费，如需对密码子进行优化则另计费。

多基因的共表达服务承诺

1. 在客户保证提供的基因序列正确的前提下，本公司承诺在实验中不会引入突变；
2. 本公司可免费提供常用的载体以满足实验的需要，但如果基因中酶切位点较多不能实现常规的克隆，涉及定点突变或其它方案构建重组质粒则需另计费；
3. 可随时咨询实验进展，实验结束后提供完整的实验报告（包括SDS-PAGE电泳结果等）；
4. 实验保证质量，尽量节约时间，并对实验内容及结果进行保密。

多基因的共表达服务特色：

技术人员有丰富的经验，可以针对客户的不同需求制定高效合理的实验方案，减少实验步骤，为客户节约时间和金费。可对单个基因的启动子进行调节，实现多基因的协同共表达，结合多质粒表达系统共表达基因的数量可多达20个。

客户须知

1. 客户应保证所提供原材料即基因序列的正确性。如基因模板本身具有移码突变或碱基突变，由此造成的实验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。
2. 客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
3. 如实验失败，本公司将退回客户已付款项，但不做任何其它赔偿，亦不承担任何连带责任。

多基因的共表达成功案例

在同一质粒上成功实现四个基因的协调共表达。