用GST融合蛋白沉降技术检测蛋白质-蛋白质相互作用

服务简介

利用重组技术将探针蛋白与GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通过GST与固相化在载体上的GTH(Glutathione)亲和结合。因此,当与融合蛋白有相互作用的蛋白通过层析柱时或与此固相复合物混合时就可被吸附而分离。GST融合探针蛋白和 任何结合分子被离心收集,获得的混合物经洗涤后,用过量游离的谷胧甘肤洗脱或直接在SDS-PAGE上样缓冲液中煮沸。蛋白质经SDS-PAGE分离后进 行下一步的western印迹、放射自显影及蛋白质染色分析。GST沉降技术对探测蛋白在溶液中的相互作用特别有用,而这种相互作用在膜的分析中可能是检测不到的。

服务内容

1. 原核蛋白表达(GST融合蛋白)

2. Pull-Down实验及检测

服务周期

服务内容 服务价格 服务周期
样品及抗体准备(可选) 询问 2-3周
表达载体构建(可选) 1500 1-2周
融合蛋白的表达及检测(可选) 3000 2-3周
细胞准备及转染(可选) 3000 2-3周
Pull Down 5000 2-3周
qPCR蛋白相互作用检测 3500/对 2-3周