高GC、长片段基因的原核表达

高GC、长片段基因的原核表达

基因工程技术的快速发展使常规基因的克隆与表达变得便捷与高效，但是对于GC含量较高的基因或者是长片段基因的克隆与表达往往存在一定的难度。许多研究者在实验过程中很可能遇会到以下难题：基因的表达水平较低或者不表达等。而高GC且长片段基因的表达更是困扰着各类科研人员，这些都严重的影响实验的进展，即使投入大量的时间和金费，也不一定能达到让人满意的效果。

针对客户在上述相关实验中遇到的困难，赢润生物技术部拥有一套完备的高GC、长片段基因原核表达系统。通过对表达载体及表达宿主的选择，可以实现高GC、长片段基因的成功表达；对诱导体系的进一步优化和探索，可以实现高GC、长片段基因的高效可溶性表达。赢润生物将为您提供一流的技术服务，排除高GC含量基因、长片段基因以及高GC、长片段基因带给您的困惑。

高GC、长片段基因的原核表达适合服务的案例

1. 基因片段过长或富含GC导致表达失败；
2. 基因片段过长或富含GC导致表达效果较差；
3. 其它一些基因在表达过程中效果不理想的。

高GC、长片段基因的原核表达实验流程

实现长片段基因的高效表达一般需要15到30个工作日。

优化表达条件

可从以下方面使目标蛋白的表达达到最优化：

1. 增加蛋白溶解性及折叠

   温度、裂解缓冲液、细胞周质定位、细胞质定位、宿主菌

2. 稀有密码子
3. 毒性基因及质粒稳定性
4. 影响表达的其它因素

   N-端原则、二级翻译起始位点、意外终止密码子、转录终止子、不稳定目的 mRNA及蛋白

高GC、长片段基因的原核表达客户提供

1. 提供含目的基因的重组质粒（或含重组质粒的菌株），运输过程中采取相应的措施避免质粒的降解或菌株的污染；
2. 提供基因的序列及重组质粒的测序报告，载体的相关资料；
3. 如有其它特殊要求请提前说明。

高GC、长片段基因的原核表达服务内容及价格

如需进行Western Blot 检测则另计费，如需采用较特殊的表达宿主则另计费，如需对密码子进行优化则另计费。

高GC、长片段基因的原核表达服务承诺

1. 在客户保证提供的基因序列正确的前提下，本公司承诺在实验中不会引入突变；
2. 宿主同源基因目的蛋白表达含量可占蛋白总量80%以上，宿主异源基因目的蛋白表达含量一般可占蛋白总量50%以上；
3. 可随时咨询实验进展，实验结束后提供完整的实验报告（包括SDS-PAGE电泳结果、最佳诱导条件等）及相应的表达菌株；
4. 实验保证质量，尽量节约时间，并对实验内容及结果进行保密。

高GC、长片段基因的原核表达客户须知

1. 客户应保证所提供原材料即基因序列的正确性。如基因模板本身具有移码突变或碱基突变，由此造成的实验时间延误、重复实验费用或其它经济损失均由客户承担。
2. 客户应对所提供的材料及信息负责，如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
3. 如实验失败，本公司将退回客户已付款项，但不做任何其它赔偿，亦不承担任何连带责任。

高GC、长片段基因的原核表达成功案例

在大肠杆菌中成功实现349.0 kDa 巨大蛋白的表达。

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