MicroRNA靶基因验证套餐
MicroRNA是否可以对目的基因进行干扰,目前已有相应的软件和网站可以进行预测,但是其提供的数据只是理论上的。选择的microRNA是否能够干扰目的基因,还是需要通过相关的“MicroRNA靶基因验证实验套餐”来进行具体探讨。
MicroRNA靶基因验证套餐实验流程
本公司特推出“MicroRNA靶基因验证套餐”,为客户寻找或验证microRNA的靶基因。大致的实验流程如下:
- 构建pri-microRNA或pre-microRNA载体、含靶位点的荧光素酶报告基因载体及对照载体。
- 将pri-microRNA或pre-microRNA载体与荧光素酶报告基因载体共转染至293、CHO、Hela等工具细胞中。
- 比较处理组与对照组的荧光素酶活性,确定目的microRNA和目的基因之间的关系。
- 构建含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体。
- 将pri-microRNA或pre-microRNA载体与含突变靶位点的荧光素酶报告基因载体共转染至293、CHO、Hela等工具细胞中,比较处理组与对照组的荧光素酶活性,验证前面初筛的结果。
MicroRNA靶基因验证套餐服务价格及周期(S4010):
| 项目 | 价格 | 周期 |
|---|---|---|
| 材料准备 | ||
| pri-miRNA | 3500元 | 3~4周 |
| pri-miRNA 空载对照 | 500元 | 现货 |
| pre-miRNA | 2000元 | 1~3周 |
| pre-miRNA NC对照 | 500元 | 现货 |
| pMIR-REPORT miRNA Expression Reporter质粒 | 免费提供 (如需产品另外计算费用) | 现货 |
| 含靶位点的荧光素酶报告基因载体构建 | 1500~2000元 | 2~3周 |
| 定点突变 | 1500元 | 2~3周 |
| 转染级质粒大提(100ug) | 250元/个 | 2~3天 |
| 主体实验 | ||
| 细胞培养及转染 | 1500元 | 1周 |
| 双荧光素酶检测 | 1500元/次 | 1周 |
(注:部分内容可选做)
客户须知:
- pri-miRNA和pre-miRNA可从本公司MicroRNA库中订购,亦可由客户提供,或者由本公司为客户从Ambion等公司代购。
- 荧光素酶报告基因载体可以选用pMIR-REPORT miRNA Expression Reporter,亦可选用其它载体,例如pGL3系列载体。
- 插入的候选靶基因的3′UTR序列默认长度约为50~70bp,即预测靶位点序列加上两端各一小段序列。如客户需要插入更长的3′UTR序列,实验费用另外计算。
