有效shRNA筛靶套餐
软件设计或者现有shRNA库通常可以提供3~5条shRNA，但是在RNA干扰主体实验中，一般用1~2条shRNA进行实验即可。因此，在进行RNA干扰主体实验之前，有必要进行有效shRNA筛靶。
有效shRNA筛靶套餐即在3~5条出发shRNA中筛选1~2条干扰效率最高的shRNA，以进行后续实验。
如果目的细胞的质粒转染效率较高（大于70%），则有效shRNA的筛靶可以直接在目的细胞中进行，即所谓的“有效shRNA内源筛靶”。而如果目的细胞的质粒转染效率一般（小于70%），则有效shRNA筛靶可以在293、CHO等工具细胞中进行，即所谓的“有效shRNA外源筛靶”。
无论是内源筛靶，还是外源筛靶，其基本步骤都包括：
- shRNA表达载体构建。
- 目的基因过表达载体构建（内源筛靶可省；293等工具细胞中如有目的基因的高表达，亦可省去此步骤）。
- 细胞培养及转染。
- RNA干扰效率检测（RT-PCR、Western-blot等）。
本公司根据以上服务内容，推出有效shRNA筛靶套餐，包括有效shRNA内源筛靶套餐（S4003）、有效shRNA外源筛靶套餐（S4004），您可以根据需要订购相应的筛靶套餐。
TIPS：什么情况下选择外源筛靶？
- 目的细胞不易得到，例如原代细胞、稀有细胞株，或者目的细胞暂时还未到位。
- 目的细胞转染效率低（转染效率低于70%）。
- 目的细胞需要诱导才能表达靶基因。
- 目前尚无靶基因的抗体。
如果存在上述情况，您可以选择外源筛靶。
选择外源筛靶时，有效shRNA的筛选通常在293、CHO等工具细胞中进行。这些细胞培养容易、质粒转染效率高，是很好的研究平台。
如果293等工具细胞中有目的基因高表达，则可直接导入shRNA表达载体，进行筛选。而如果293等细胞中目的基因表达量低，则需要额外共转染一个目的基因的过表达载体，人为地创造一个目的基因高表达环境，以便于shRNA的筛选和验证。在表达目的基因时，还可以带入EGFP、RFP等荧光标记，或者Flag、Myc、His等标签，以便于后续RNA干扰效果的检测。
有效shRNA内源筛靶套餐（S4004）
| 项目 | 价格 | 周期 |
|---|---|---|
| 预实验：确定目的细胞的质粒转染效率 | 免费 | 1周 |
| shRNA表达载体构建 （默认为三条） | 1500元/条 （三条套餐优惠价4000元） | 2~3周 |
| NC对照 | 免费 | 现货 |
| 转染级质粒大提（100ug） | 200x4=800元 | 2~3天 |
| 细胞培养 | 150x5=750元 | 1周 |
| 细胞转染 | 50x5=250元 | 2~3天 |
| RT-PCR检测 | 1500元 | 1周 |
| Western-blot | 1500元 （不包一抗，免费提供二抗） | 1~2周 |
| 共计 | 以三条计算，全套8800元 （不包括一抗购买费用） | 4~6周 |
（注：部分内容可选做。）
有效shRNA外源筛靶套餐（S4005）
| 项目 | 价格 | 周期 |
|---|---|---|
| 预实验：确定目的细胞的质粒转染效率 | 免费 | 1周 |
| 预实验：293等工具细胞中目的基因表达量 | 500元 | 1周 |
| shRNA表达载体构建 （默认为三条） | 1500元/条 （三条套餐优惠价4000元） | 2~3周 |
| NC对照 | 免费 | 现货 |
| 购买目的基因 | 1500~2000元 | 1周 |
| 目的基因过表达载体构建 | 1500~2000元 | 2~3周 |
| 转染级质粒大提（100ug） | 200x5=1000元 | 2~3天 |
| 细胞培养 | 150x6=900元 | 1周 |
| 细胞转染 | 50x6=300元 | 2~3天 |
| RT-PCR检测 | 1000元 | 1周 |
| Western-blot | 1700元 | 1~2周 |
| 共计 | 以三条计算，全套12000元 （不包括一抗购买费用） | 4~6周 |
（注：部分内容可选做。）