shRNA表达载体构建

作为RNA干扰实验的第一步，靶位点的选择，以及相应的shRNA表达载体构建，是整个RNA干扰实验的重中之重。靶位点选择恰当，shRNA干扰效率高，整个RNA干扰实验就能够事半功倍，否则，就会做许多无用功。

shRNA表达载体构建后均可作为YRBIO腺病毒包装系统中的穿梭载体使用。如果目的细胞质粒转染效率较低，则可直接以这些载体为基础包装腺病毒，利用腺病毒感染目的细胞。

目前，有许多免费软件或网站能够提供靶位点选择及shRNA序列设计，但是这种免费软件算法落后，设计出的shRNA序列有效率只有25%~30%左右。与之相对应的，是一些商业化软件，或者现成的商业化shRNA库，由于其算法先进，设计原则合理，其提供的shRNA序列的有效率通常能达到75%以上，亦即可以达到每四条shRNA有三条有效。所以，如果采用商业化软件来设计shRNA，或者直接购买现成的商业化shRNA库，将能使您在整个RNA干扰实验之始便占得先机。

基于以上，赢润生物在国内率先引进代表RNA干扰领域全球顶尖水准的TRC（The RNAi，RNA干扰协会）开发的TRC shRNA库。该库针对人、小鼠、大鼠等数万个基因，每个基因提供3~5条shRNA（已构建至载体上），总数达五万多条，且数量还在不断增加。经过大规模实验验证，其中超过75%均为有效shRNA，其干扰效率均大于70%（大多数超过80%）。

以此shRNA库为基础，针对每个基因，我们可为您提供3~5条高质量的shRNA序列，并且为您构建到shRNA真核表达载体上。由于此数据库中的shRNA序列有效性超过75%，亦即理论上来说，每一套shRNA克隆中，必定至少有一条shRNA的干扰效率超过70%。所以，您再也不必担心选择的shRNA序列没有干扰效果，您再也不用费时费力费心地去一遍遍地筛选有效的shRNA序列。选用此shRNA库，您会发现，原来RNA干扰实验会如此简单！

您只需告诉我们您需要干扰的目的基因，我们就会为您从数据库中调取相应的shRNA序列信息，然后，您可以选择合适的shRNA表达系统来表达shRNA，进行RNA干扰实验。

原装进口TRC shRNA表达系统（S4001）

TRC shRNA数据库拥有一套原装的shRNA表达系统相匹配，针对每个基因的一套shRNA序列均已构建至相应的shRNA表达载体上，您购买回去后就可直接使用。整套产品均为原装进口，本公司未做任何改动。

此系统中，装载shRNA序列的真核表达载体pLKO.1，同时也是第三代慢病毒包装系统中的穿梭载体。也就是说，如果您的目的细胞质粒转染效率较高（建议大于70%），则您可以直接使用带有目的shRNA的pLKO.1质粒进行RNA干扰实验。而如果您的目的细胞质粒转染效率较低，那么您只需再购买相应的慢病毒包装系统中的包装质粒、转染试剂、293T包装细胞，您便可以将这些shRNA包装慢病毒，利用慢病毒的高感染效率、高表达效率、长期表达特性，更好地进行RNA干扰研究实验！

原装进口shRNA真核表达载体pLKO.1质粒图谱

选用原装进口shRNA表达系统具有优点：

1. 原装进口产品，本公司未做任何改动。
2. SCI文献广泛采用，国际接受度高。
3. 装载shRNA序列的真核表达载体，同时也是慢病毒包装系统中的穿梭载体，可用以包装慢病毒。

缺点：载体上没有荧光标记。

shRNA表达载体构建服务价格及周期（S4001）：

项目	价格	周期
TRC shRNA克隆套装	4250元	3~4周
pLKO.1空载对照	500元	现货
pLKO.1-EGFP对照	700元	现货
转染级质粒大提（100ug）	300元/个	2~3天
测序	50元/个	1周

客户须知：

1. TRC shRNA克隆套装，原装产品为3~5管甘油菌，本公司免费提取质粒。
2. 原装产品无测序报告，客户可拿到质粒后自己测序，TRC及本公司保证质量。
3. 本公司可在发货前代为测序，由于shRNA发夹结构测序困难，故测序费用为50元/个。
4. 原装产品无空载对照，NC对照需另外购买（目录价3500多元），本公司可以500元优惠价提供pLKO.1空载对照，或者以700元优惠价提供pLKO.1-EGFP对照。
5. 由于小提质粒在转染细胞时，无论是浓度、纯度还是内毒素含量均不是很合格，所以本公司建议您订购一个“转染级质粒大提”服务，优惠价300元/个，至少提供转染级大提质粒100ug。

shRNA表达载体构建质量保证：

本公司承诺，针对某个基因的TRC shRNA克隆套装中（3~5条shRNA），至少有一条shRNA是有效的，其干扰效率大于70%。在目的细胞转染效率大于80%，且客户检测shRNA有效性的实验方法恰当、操作正确的前提下，如果没有达到上述标准，本公司将全额退还客户已付款项。

赢润生物 shRNA表达系统（S4002）

TRC shRNA克隆套装中的原装进口质粒，由于不带荧光标记，使得质粒转染细胞后，不好确定转染效率。针对这一缺点，赢润生物将自己的shRNA表达系统与TRC shRNA库相结合，为客户提供更贴心、更灵活，且RNA干扰效率丝毫不减的shRNA表达质粒产品。也就是说，shRNA序列依然参考TRC shRNA库中的数据，而承载这些shRNA片段的载体，则采用多种启动子、多种荧光标记可供选择的赢润生物shRNA表达系统。

本公司目前提供的shRNA真核表达载体，共有hU6、mU6、hH1、h7SK等四种polIII型启动子可供选择，可选择携带荧光（包括绿色荧光、红色荧光）或不携带荧光。除此之外，本公司还提供mirshRNA真核表达载体，可以进行mirshRNA真核表达载体构建。

构建的shRNA真核表达载体或者mirshRNA真核表达载体，由于载体上均带有LR同源重组臂，所以这些载体均可作为本公司腺病毒包装系统中的穿梭载体使用。如果您的目的细胞质粒转染效率较高（建议大于70%），则您可以直接使用带有目的shRNA的pYr系列质粒进行RNA干扰实验。而如果您的目的细胞质粒转染效率较低，则可直接以这些载体为基础包装腺病毒，利用腺病毒感染目的细胞。利用腺病毒的高感染效率、高表达效率，更好地进行RNA干扰研究实验！

既可以用来当普通的shRNA真核表达载体用，同时又是穿梭载体，可以拿来包装腺病毒，花一份钱，买两样东西！而且其干扰有效性、干扰效率大部分都超过 80%！这么超值、这么优秀、性价比如此高的shRNA产品，您还等什么呢？赶紧拨打我们的电话，或者通过QQ、Email联系我们吧，您只需报上目的基因的NCBI序列号，后面的事，我们替您完成！

赢润生物shRNA真核表达载体pYr-1.1-hU6-EGFP质粒图谱

选用赢润生物shRNA表达系统，具有如下优点：

1. shRNA序列数据依然来自国外成熟shRNA数据库，质量有保证。RNA干扰效率的高低主要取决于靶位点的选择、shRNA序列的设计，而由于本公司所采用的shRNA序列来自国外成熟shRNA数据库，算法先进，靶位点成功率高，所以shRNA的干扰成功率非常高。
2. 您可以选择构建一条或者多条，灵活度高。
3. 多种启动子，有荧光或无荧光，绿色荧光或红色荧光等可自由选择，以更好地配合后续实验。
4. 载体可作为普通shRNA表达载体使用，亦可作为腺病毒包装系统的穿梭载体使用，以进行腺病毒包装。

shRNA表达载体构建服务价格及周期（S4002）：

项目	价格	周期
shRNA表达载体构建	1500元/条	2~3周
NC对照	500元（三条以上免费赠送）	现货
转染级质粒大提（100ug）	300元/个	2~3天
测序	免费	2~3天

客户须知：

1. 请事先确定是否需要荧光。
2. 您可以订购赢润生物shRNA克隆套装（已装载至载体的三条shRNA、NC对照质粒），仅需4500元。
3. 由于小提质粒在转染细胞时，无论是浓度、纯度还是内毒素含量均不是很合格，所以本公司建议您订购一个“转染级质粒大提”服务，优惠价300元/个，至少提供转染级大提质粒100ug。

shRNA表达载体构建质量保证：

1. 本公司承诺，如客户订购针对某个基因的赢润生物shRNA克隆套装（3~5条shRNA），则本公司保证其中至少有一条shRNA是有效的，其干扰效率大于70%。在目的细胞转染效率大于80%，且客户检测shRNA有效性的实验方法恰当、操作正确的前提下，如果没有达到上述标准，本公司将免费为客户重新设计和构建两条shRNA。如果五条shRNA都无效，则本公司将全额退还客户已付款项。
2. 如果shRNA序列由客户自己设计，本公司只负责将shRNA表达载体构建成功，对其中shRNA的干扰有效性不做任何保证。
3. 如果客户订购的shRNA条数在三条以下，本公司不保证设计的shRNA一定有效。
4. 如果shRNA的有效性验证实验客户亦委托本公司完成，则验证部分的实验费用不免费。