定点突变
体外定点突变技术是当前生物、医学各领域研究中的一种重要实验手段,是改造、优化基因的便捷方案,是探索启动子调节位点的有效手段,也是研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系的有力工具。
赢润生物定点突变技术团队掌握多种高效的定点突变技术并有着丰富的分子生物学实验经验,可以根据您的课题背景及要求设计出合理、优化的实验方案并准确高效地执行实验路线。
定点突变客户提供:
- 含有待突变基因的高纯度质粒,不少于10µg,电泳图清晰,达酶切及测序要求;
- 待突变基因原始序列文件及原始测序图片文件(不能提供序列的加测序验证费用35元/反应,30元/测序引物)、突变目标序列及详细信息、基因两端酶切位点,并提供待变基因的生物特性,如是否影响细菌增殖等特性;
- 相关载体大小、抗性及图谱等信息;默认情况下,突变基因将克隆至T载,若需要克隆至目的载体,请提供目的载体及其详细信息。
定点突变流程:
- 对待突变基因测序结果进行分析,设计突变方案;
- 根据突变方案设计合成覆盖突变位点的双向引物,合成目的DNA两端引物,进行高保真PCR反应;
- 默认情况下,将PCR产物克隆至T载,或者根据客户要求亚克隆至目的载体;
- DNA测序验证突变序列的正确性。
定点突变服务价格及周期
| 基因长度(bp) | 突变点数 | 周期 | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 3个以上 | ||
| <1000 | 1200 | 2200 | 3000 | 询价 | 2-4周 |
| 1000-2000 | 1500 | 2800 | 4000 | 询价 | |
| 2000-4000 | 2000 | 3600 | 5000 | 询价 | |
| >4000 | 询价 | 询价 | 询价 | 询价 | |
- 相邻的两个碱基突变(6bp以内)按照一个点收费。
- 具有复杂结构(如重复结构、回文结构或GC含量过高等)的突变基因将视具体情况而收费。
定点突变交付结果
- 突变成功的重组质粒和甘油菌;
- 详细实验报告,包括突变基因测序报告、比对结果。
客户须知
- 客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担;
- 如无特殊说明,突变基因将克隆至T载;若需亚克隆至目的载体,请提供目的载体及其详细信息,服务价格相应上调300元;
- 如实验失败,本公司将退回客户已付款项,但不做任何其它赔偿,亦不承担任何连带责任。
