TA克隆

TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)是一种把PCR片断与一个具有3‘-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所适用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3'加上A。例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3’-T突出末端的DNA片断才能通过T/A配对进行连接。所以TA克隆不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理。不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行克隆。TA克隆系统提供的T载体用于直接高效地接PCR产物。

TA克隆服务项目及费用

  1. 我们一次收费内容只包含PCR纯化,连接转化,克隆筛选,一个测序反应,及质粒和穿刺菌。当克隆片段大于600bp时,需要测通全序列,按照正常对外测序要加收相应的测序及合成中间测序引物的费用。
  2. 如果客户使用含3' →5' 外切酶活性的聚合酶扩增所得到的PCR产物,我们需要重新扩增PCR产物,则要加收PCR扩增费用50元。
  3. 如果使用pUC57-T Simple载体,则需加收费用50元。如果客户需要可提供其他阳性克隆的穿刺菌,需另外收费20元/克隆。